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【新年活动】小鼠白细胞介素12(IL-12)ELISA试剂盒优惠活动中!

     小鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒本次活动解释权归南京金益柏所有!

      小鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒劲爆价优惠活动中!

产品名称规格原价活动优惠价
小鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒48T1200800  (含税和运费)
小鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒96T18501200(含税和运费)

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      作者单位:南京大学生命科学学院药物生物学国家重点实验室,南京大学生命科学研究所生命科学分析化学国家重点实验室和生命科学化学协同创新中心

      发表日期:2016年11月30日

      ELISA试剂盒从南京金益柏厂库出库前,都经过专业有多年经验的质检人员检验,金益柏的产品是值得信赖的产品,每一款产品都会配备相应的elisa试剂盒说明书,便于科研人员操作,保质期内出现问题,公司售后完全,购买金益柏elisa试剂盒产品还提供免费数据代测服务技术扶持等额外服务。

      规格:96T/48T
      品牌:南京金益柏生物科技有限公司
      库存状态:现货供应
      保存:2-8℃,避光保存
      有效期:六个月
   

     小鼠白细胞介素12(IL-12)ELISA试剂盒使用说明书】

      一、实验原理
      本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
      二、ELISA试剂盒性能
      1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
      2.批内与批见应分别小于9%和11%
      三、实验组成
      1. 微孔板 (固相抗体)96 well
      2. 标记抗体 (30倍浓缩,HRP标记抗体)0.4 ml
      3. 标准品    0.5 ml × 2
      4. EIA缓冲液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS)    30 ml
      5. 标记抗体稀释液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS)   12 ml
      6. 显色液 (TMB底物液)15 ml
      7. 终止液 (1N硫酸)12 ml
      8. 洗涤缓冲浓缩液 (40倍浓缩,0.05% Tween-20的磷酸缓冲液)50 ml
      四、实验步骤
      1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
      2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
      3、加酶标抗体:在各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
      4、加底物液显色:在各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
      5、终止反应:在每孔中加入1滴终止液混匀
      6、结果判定:在450mm处测光值,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则       410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
     五、实验操作过程中的提示
      ⑴ 严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
      ⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
      (3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
      (4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
      (5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
      (6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
      (7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
      (8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
      (9)应保证C清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。
     六、ELISA实验中注意事项
      1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
      2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
      3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
      4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
      6. 底物请避光保存。
      7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
      8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
      9. 本试剂不同批号组分不得混用。
      10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

    【公司简介】      

     南京金益柏生物科技有限公司位于六朝古都江苏省南京市国家级白下高新技术产业园,是一家专业从事“自主产品研发生产、技术服务、知名品牌代理”的高新技术生物公司。以为生命科学工作者提供全方位高水平的产品及技术服务为经营宗旨,有别于众多国内企业单纯代理贸易的简单运营模式,强调高端技术的掌握和优化、自主产品的研发和生产,强调良好的售后服务和技术支持,努力打造中国乃至全球知名品牌。公司拥有高水平的技术研发团队,建立多种技术平台,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学、药学等领域。

   

      公司地址位于南京市国家级白下高新技术产业园

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